北京治疗白癜风的地方 https://jbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/细胞色素b5含量检测试剂盒（可见分光光度法）
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品货号：BA
产品规格：50管/48样
产品简介：
细胞色素P酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素P和细胞色素b5是P酶系的两个血红素蛋白，其比值的变化与P代谢活性密切相关。
氧化型细胞色素b5经连二亚硫酸钠还原后，在nm处有最大吸收峰，通过测定nm和nm处吸光值的差异，即可计算出细胞色素b5的含量。
产品组成：
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加mL蒸馏水，充分溶解。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
工作液配制：临用前配制，戴一次性手套，小心打开试剂三瓶盖，加试剂二50mL充分溶解，4℃避光可保存1周。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
样品中细胞色素b5提取：
1.除去细胞核，线粒体等大分子物质：称约0.5g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，00g4℃离心30min，取上清液，转入超速离心管中。
2.粗制微粒体：000g，4℃离心60min，弃上清液。
3.除血红蛋白等杂质：向步骤2的沉淀中加1mL试剂一，盖紧后充分震荡溶解，000g离心30min，弃上清液。
4.待测液：向步骤3的沉淀中加试剂二0.5mL，盖紧后充分震荡溶解，即待测液，该待测液需当天测定。
细胞色素b5含量测定操作：
1.分光光度计预热30min。
2.工作液置于25℃水浴中预热30min。
3.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL蒸馏水，0μL工作液，室温静置2min，nm和nm处吸光值，nm处吸光值记为A空白管1，nm处吸光值记为A空白管2。△A空白管=A空白管1-A空白管2。
4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL待测液，0μL工作液，室温静置2min，nm和nm处吸光值，nm处吸光值记为A测定管1，nm处吸光值记为A测定管2。△A测定管=A测定管1-A测定管2。
注意：只需要做一个空白管。
样品细胞色素b5含量计算公式：
(1)按照蛋白浓度计算
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细胞色素b5含量(nmol/mgprot)=(△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总÷（Cpr×V样）
=0.×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr
(2)按照样本质量计算/p>
细胞色素b5含量（nmol/g鲜重）=(△A测定管-△A空白管)÷ε÷d×V反总×（V样总÷V样）÷W
=0.×(△A测定管-△A空白管)÷W
ε：还原型细胞色素b5纳摩尔消光系数，×10-3L/nmol/cm；d：比色皿光径（cm），1cm；V反总：反应体系总体积，1.05mL=0.L；Cpr：待测液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；V样：加入反应体系中待测液体积，50μL=0.05mL；V样总：待测液总体积，0.5mL；W：样品质量，g。
