血红蛋白病

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血球试剂是属于医疗器械范畴下的体外诊断试剂,与血液细胞分析仪相配套使用,供临床检测血细胞计数、血红蛋白含量和血细胞分类等。

血球试剂的检验原理

血球试剂是一种具有一定的pH、恰当的渗透压、电导率和电解质平衡液,与人体血细胞按一定比例稀释,能使人体血细胞保持正常生理形态,且分散不易团聚;

血球试剂能安全溶解红细胞,释放血红蛋白并与之形成稳定的化合物,并在nm处测定其吸光度值,得到其血红蛋白含量,同时通过阻抗法检测白细胞总数(WBC)。

主要成分及样本要求

主要成分:Na2SO4、NaCl、呲啶硫酮钠、盐酸普鲁卡因、ADA、二甲基脲

样本要求:EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血

血球试剂的参考范围

红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MON)、嗜中性粒细胞(NEU)、嗜酸性粒细胞(EOS)和嗜碱性粒细胞(BAS)

血球试剂的性能指标

使用前先确认背景计数,白细胞总数(WBC)≤0.3×10/L,红细胞计数(RBC)≤0.05×10/L,血小板计数(PLT)≤10×10/L,血红蛋白含量(HGB)≤2g/L。

血球试剂常用分类

血球试剂是与血液细胞分析仪相配套使用,供临床检测血细胞计数、血红蛋白含量和血细胞分类等,属于医疗器械范畴下的体外诊断试剂。血细胞分析仪主要分为三种常用试剂:稀释液,溶血剂,清洗液。

稀释液

血细胞稀释液通常是一类具有酸碱缓冲作用(常用缓冲剂包括ADA、TRIS、HEPES、咪唑等)、适当的离子强度和电导率的等渗溶液。

适当的离子强度、与血浆相同的渗透压,能在一定时间内完整的保持血细胞原来的体积;合适的电导率能保证获得与细胞体积相应的脉冲大小。

稀释液是临床检验中血细胞分析仪最常用的一种试剂,是完成血细胞分类或计数的关键试剂。

进行血细胞分析前,清洗液与稀释液相互配合将仪器检测单元的容器与管道清洗干净,以此来降低仪器的背景值,避免前一检测样本对本次检测的干扰。

除此之外,稀释液还起到维持白细胞、血小板原有形态,确保仪器对白细胞进行准确分类的作用。

溶血剂

溶血剂是血液细胞分析仪最常用的试剂之一,也是白细胞及各分群计数、HGB含量测定的关键试剂。

被稀释的血液加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血红蛋白,后者与溶血剂中相关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白检测系统,在特定波长(一般在~nm)下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比,仪器便可显示其浓度;同时,不同类型的白细胞(淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等)经溶血剂作用后形成明显的差异,根据这些差异,仪器可以将血液样本中的白细胞分成几个类群,并对白细胞总数及各类群的数量进行统计。

现有技术中公开了多种用于白细胞分类的试剂,如CN9涉及一种用于白细胞五分类计数的溶血剂及用途。

所述溶血剂由溶血剂A与溶血剂B组成,溶血剂A由聚氧乙烯型非离子表明活性剂、有机酸、季铵盐阳离子表面活性剂助溶剂、稳定剂和渗透压调节剂组成;溶血剂B由碱性无机盐和渗透压调节剂组成。该溶血剂能够将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞,获得各类白细胞数量。其中表面活性剂可用DTAC、DTAB、TTAB、TTAC、CTAB等。

清洗液

清洗液的其主要作用就是清洗仪器管路中血液和血液留下各种蛋白,降低血液的交叉污染,保证结果的可靠性和准确性,并提供足够湿润的环境,以便迅速的从整个流量系统中赶走气泡。

组成一般包括优质的两性表面活性剂、动物水解蛋白酶、防腐剂、甲酸钠、氯化钠、缓冲剂如ADA、TRIS、HEPES、咪唑等。

清洗剂是血细胞分析仪必不可少的一员,是保证检测结果准确的重要因素。

同时,清洗剂除了质量对清洗结果有影响以外,清洗的方法也会对结果产生影响,应做到每日清洗,每周及月保养,做到开机检测则必须清洗,只有这样,检测结果才能更准确,仪器才能更加长寿。

此外,血细胞分析用到的其他试剂还有抗凝剂。

国际学标准化委员会(ICSH)已经推荐在血细胞计数及筛分时使用K2EDTA(乙二胺四乙酸)作为血标本所选抗凝剂。

使用推荐浓度的EDTA盐(K2EDTA及K3EDTA)在采血后1~4小时内所测结果无显著性差别。

正确使用分析中所用到的试剂,才能使检测结果更加准确。

检验结果解释及局限性

当以上提及的检验项目超出范围,仪器会出现相应的提示(超出范围用“H”表示,低于范围用“L”表示),更详细的结果解释见仪器操作手册。

处理某些特殊的样本(如肝病患者血或孕妇血等),红细胞较难溶解,会严重干扰白细胞的计数和分类结果,仪器会出现相应的报警,遇到此情况,应做镜检。

血球试剂的注意事项

1、如发现血球试剂有冻结现象,请先将其解冻,混合均匀后使用。

2、使用时若不慎溅到皮肤或眼睛,请用清水冲洗,如有不适感,请及时就医。

3、万一发生误食血球试剂的情况,请立即催吐,并及时就医。

4、检验的废液约20L加入次氯酸钠约mL混匀,10分钟后可以排入下水道,对人体及环境无害。

5、血球试剂仅用于体外诊断。

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