北京哪个医院看白癜风最好 https://jbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/etbdf/胃蛋白酶活性检测试剂盒（微量法）
产品货号：BA
产品规格：管/48样
产品简介：
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物酪氨酸在nm下有特征吸收峰。通过测定吸光值的变化来计算酶活。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
产品组成：
溶液的配制：
1.试剂一：临用前加入10mL试剂二，充分溶解；
2.试剂三：临用前加入10mL蒸馏水，充分溶解。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤（仅供参考）：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取约0.1g组织加入1mL提取液进行冰浴匀浆或者0.1mL胃液加入0.9mL提取液。00rpm4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
2.操作表：
注意：对照管后加样本，而测定管先加样本
三、胃蛋白酶活性计算
A、用微量石英比色皿
1.按样本蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/mgprot）=（A÷ε÷d×V反总）÷（Cpr×V样本）÷T=0.×A÷Cpr
2.按样本质量计算
活性单位定义：37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/g质量）=（A÷ε÷d×V反总）÷（W×V样本÷V提）÷T=0.×A÷W
3.按液体体积计算
活性单位定义：37℃下每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/mL）=（A÷ε÷d×V反总）÷（V样本÷V提×V液）÷T=7.86×A
Cpr：样本蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；W：样本质量，g；V反总：反应总体积，0.22mL；V提：粗酶液总体积，1mL；T：催化反应时间，10min；V样本：加入样本体积，0.02mL；V液：液体体积，0.1mL；ε：酪氨酸吸光系数，1.4μmol-1·mL·cm-1；d：光程，1cm。
B、用96孔UV板
1.按样本蛋白浓度计算
活性单位定义：37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/mgprot）=（A÷ε÷d×V反总）÷（Cpr×V样本）÷T=1.31×A÷Cpr
2.按样本质量计算
活性单位定义：37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/g质量）=（A÷ε÷d×V反总）÷（W×V样本÷V提）÷T=1.31×A÷W
3.按液体体积计算
活性单位定义：37℃下每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
胃蛋白酶酶活（U/mL）=（A÷ε÷d×V反总）÷（V样本÷V提×V液）÷T=13.1×A
Cpr：粗酶液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；W：样本质量，g；V反总：反应总体积，0.22mL；V提：粗酶液总体积，1mL；T：催化反应时间，10min；V样本：加入样本体积，0.02mL；V液：液体体积，0.1mL；ε：酪氨酸吸光系数，1.4μmol-1·mL·cm-1；d：光程，0.6cm。
