血红蛋白病

首页 » 常识 » 常识 » 谷氨酰基转移酶GGT检测试剂盒
TUhjnbcbe - 2023/11/2 21:18:00
白癜风治疗专科医院 https://yyk.39.net/bj/zhuanke/89ac7.html

γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)

产品货号:BA

产品规格:T

产品简介:

L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶,γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。GGT主要存在于肝细胞膜和微粒体上,参与谷胱甘肽的代谢,血清中主要来自肝胆系统,当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中GGT往往容易增高。

γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物,在GGT催化下γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上同时释放出游离的α-萘胺,后者与重氮盐反应产生红色化合物,其颜色深浅与GGT浓度呈正比,通过比色法检测nm处吸光度,进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

自备材料:

1.蒸馏水

2.离心管

3.水浴锅或恒温箱

4.比色杯、分光光度计

操作步骤(仅供参考):

1.准备样品:

①血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃保存,用于GGT的检测。

②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃保存,用于GGT的检测。

③(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT含量。

2.配制GGT显色工作液:取GGT显色剂1支,加蒸馏水1ml,充分溶解,即为GGT显色储存液,该GGT显色储存液为过量(4℃保存,30天有效)。临用前,按GGT显色储存液:显色稀释液=1:0的比例混合,即为GGT显色工作液,4℃保存,24h有效。

3.配制系列萘胺标准:取适量的萘胺标准(1.5mmol/L),按萘胺标准(1.5mmol/L):GGTAssaybuffer=1:9的比例混合,即为萘胺标准工作液-萘胺标准(0.15mmol/L),按下表配制系列标准品。

4.GGT酶促反应:按照下表设置标准管、对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品的酶活性过高,可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

5.GGT测定:混匀,室温放置10min。以“0”号标准管调零,样品测定以“对照管”调零,比色杯光径1cm,分光光度计测定nm处标准管、测定管的吸光度。

计算:

以标准管活力单位(U/L)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测样品的GGT酶活力单位。

注意事项:

1.血清或EDTA抗凝血检测效果较好,肝素钠、柠檬酸、草酸、氟化物等抗凝血会引起浑浊或者抑制酶活性(10~15%)。

2.尽量避免使用溶血样品。

3.GGT活力20~(U/L)颜色由淡紫红色到紫红色梯度变化。

4.本产品仅用于科研领域,不能用于临床诊断或其他用途。

有效期:6个月有效。4℃运输,4℃保存。

1
查看完整版本: 谷氨酰基转移酶GGT检测试剂盒