在培养细胞的过程中，你是否遇到：
本应贴壁的细胞，某次传代后出现不贴壁了？
细胞养不起来，生长速度缓慢，或突然停滞生长？
细胞状态不好，视野中总是存在较多死细胞？
想要知道如何才能把细胞养好，我们需要先明确培养细胞的3个关键要素：良好的细胞来源，严谨的实验操作，正确的培养体系。关于操作，其中存在许多人为不可控因素，我们后期会另辟专题讨论，今天重点聊下如何正确选择合适的培养体系。
细胞的培养体系一般指用于培养细胞的完全培养基，它在培养细胞过程中主要发挥4大功能：提供营养物质、维持细胞稳态、提供物质传递的介质和指示细胞环境，同时也要保证培养基对所培养的细胞不会造成毒害或污染。通常情况下，细胞完全培养基是由基础培养基、细胞因子和血清所组成。
01基础培养基
目前市面上可选择的基础培养基种类很多，如常用的DMEM（高糖/低糖）、培养肿瘤细胞的RPMI等。这些基础培养基可满足大部分细胞培养的需求，但在培养某些较为特殊的细胞如干细胞时，培养的效果经常不尽人意，这便需要对培养基的成分进行个性化调整。
OriCell会通过平行试验，针对不同的细胞尝试多种基础培养基，分析并增减各培养基的成分，甚至将不同种类培养基按不同比例进行调和等多种方式，甄选出最适合细胞培养的基础培养基。
02细胞因子
细胞因子则主要为白细胞介素类、生长因子类、肿瘤坏死因子等，发挥促进增殖分化、调节免疫等作用。
03胎牛血清
在细胞培养体系中，血清是唯一不属于人工合成的成分，同时也让血清成分成为细胞培养体系中最大的不确定因素，因此，如何选择合适的血清是细胞培养得好坏的决定性因素之一。根据采血时机的不同，牛血清可分为胎牛血清（FetalBovineSerum，FBS）、新生牛血清和小牛血清，我们细胞培养中一般使用的是胎牛血清，也是最为“干净”、营养最为丰富的血清。
胎牛血清是在母牛怀孕3-8个月时，通过胎牛心脏穿刺采血获得新鲜的胎牛全血，经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白等成分的淡黄色透明上清液体，并在生产过程使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1m终端微滤方法处理而获取的血清。相比于新生牛和小牛血清，胎牛血清中所含的抗体、补体等对细胞有伤害的成分最少，因此对于一些较“脆弱”的细胞如干细胞、原代细胞，一定要使用优质的胎牛血清进行培养。
04胎牛血清的功能
血清的成分十分复杂，既有协助物质运输的蛋白、营养物质，还有促进细胞生长的激素和因子等，正因为血清这种天然成分的复杂性，使得血清在细胞培养过程中发挥了多种功能：
提供维持细胞生长的激素，促进所培养细胞的生长；
弥补基础培养基中没有或含量很少的营养物质；
提供结合蛋白，促进细胞识别和利用维生素、脂类和其他激素等；
某些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用；
促进细胞贴壁，提供可促进细胞铺展在塑料培养基质的因子；
起酸碱度缓冲液作用；
提供蛋白酶抑制剂，使细胞消化时残留的胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。
05胎牛血清的使用
在细胞培养过程中，胎牛血清的使用浓度一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。
血清对温度比较敏感，不使用时必须保存在-20℃。解冻血清时要预防沉淀发生，不能直接将冷冻的血清放入37℃水浴或者温箱中，因为血清在融化时，蛋白先融而冰块后融，局部蛋白浓度过高易发生沉淀，影响血清质量。
若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清，一般情况下不过滤也不会对效果造成影响。血清在解冻后，如果一次无法用完一瓶，可按40～50mL分装于无菌处理瓶中，再放入-20℃保存，避免反复冻融。
06胎牛血清使用不当的风险
近年来全球疫情频发，很多都是动物来源的病毒传播，我国对于动物源制品的进口一直有很严格的规定，而对于疫区来源的胎牛血清，同样存在较大的生物学污染风险，比如病毒、支原体、噬菌体污染等。这对于使用血清进行科研的实验操作人员造成了重大的潜在隐患，因此，国内官方对此也有明确的公告：未经检疫的胎牛血清可能携带传染性物质，一旦流入境内，将会对人民群众的生命健康造成重大威胁，如可能带有疯牛病病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、狂犬病毒或其他传染性物质，具有极高的检疫风险。
此外，不合格的血清对实验的重复性、稳定性和真实性也会造成严重影响。
1）无合格质检的胎牛血清存在支原体、病毒等污染，这对涉及细胞培养的实验结果会造成不良影响；
2）采血工艺不规范导致溶血，溶血较严重的血清含有许多胞内产物，对细胞有刺激作用，影响实验的稳定性和数据的真实性；
3）血清批次不稳定，实验结果难以重复。
07如何选择合适的胎牛血清
由于胎牛血清来源的特殊性，这使得选择血清也成为了一门技术活。那么如何来甄别和选择血清呢？
看产地受供体饲养环境、生产工艺等因素的影响，原产澳洲、新西兰的血清是目前品质较高的血清来源。虽然北美洲的血清质量也较高，但受疫情及国家进口政策的限制，目前尚无正规渠道购买北美的血清产品。
看外观1）颜色：根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，实际上，血红蛋白含量的高低对血清质量并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。
2）澄清度：高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低，表现为稀薄、清淡，而新生牛血清，相对而言更加粘稠，颜色略深。
3）血清沉淀：血清有沉淀，是质量问题？血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响，沉淀的产生原因很多，跟加工生产方式、是否反复冻融密切相关。虽然沉淀并不直接影响血清的质量，但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
看批间差异采购血清要