血红蛋白病

首页 » 常识 » 问答 » 单胺氧化酶MAO检测试剂盒醛苯腙微
TUhjnbcbe - 2025/2/15 18:21:00
小儿白癜风治疗方法 https://m.39.net/disease/a_6302936.html

单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)

产品货号:BA

产品规格:T

产品简介:

单胺氧化酶(MonoamineOxidase,MAO)是一组催化多种单胺类化合物氧化脱氨的酶,属于细胞外酶,含有铜离子,分布于肝脏、肾脏等组织的线粒体内,其含量分布为肝脏>心脏>肾脏>脑>肺>骨骼肌。血小板、胎盘中也含有MAO。线粒体中的MAO与膜紧密结合,仅少量为可溶性的,存在于细胞质中,血液和结缔组织中的MAO为水溶性。

尚宝生物单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)其检测原理是待测样品在MAO作用下,氧化底物苄胺生成苄醛,后者经催化反应生成醛苯腙,呈棕红色,通过分光光度计检测nm处吸光度,根据标准曲线即可测出MAO活力。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

自备材料:

1.蒸馏水

2.离心管或小试管

3.比色杯

4.分光光度计

使用方法:

1.准备样品:

①血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于MAO的检测。

②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于MAO的检测。

③高活性样品:如果样品中含有较高活性的MAO,可以使用MAOAssaybuffer稀释。

④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的MAO含量。

2.稀释标准品:用MAOAssaybuffer稀释苄醛标准(5mmol/L)至0.5mmol/L,即为苄醛标准工作液,4℃保存,备用。以苄醛标准工作液(0.5mmol/L),按下表制备标准曲线。

3.MAO检测:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

4.混匀,分光光度计nm处检测吸光度值,以蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。绘制标准曲线,根据(A测定-A空白)之差值在标准曲线上查出MAO活力单位。酶活力高于上限者,应将样品稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。

计算:

MAO活性单位的定义:在37℃1ml血清中MAO1h催化底物产生1nmol苄醛为一个MAO酶活力单位。根据酶活性定义,计算出样品中的MAO活性。

以标准管苄醛nmol数为横坐标,以吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,用(A测定-A空白之差值在标准曲线上查出待测样品的苄醛nmol数。)

血清MAO活力(U/ml或nmol/h?ml)=苄醛(nmol)×VT×N/t×Vs=苄醛(nmol)×2.5

组织MAO活力(U/mg或nmol/h?mg)=苄醛(nmol)×VT×N/(t×Vs×待测样品蛋白浓度mg/ml)

式中:

VT=待测样品总体积(μl)

N=待测样品检测前的稀释倍数

Vs=检测时所用样品体积(μl)

t=反应时间(min)

注意事项:

1.胆红素浓度小于μmol/L,血红蛋白浓度小于4g/L,对MAO活力检测没有影响。

2.若更换为国际单位,应除以60。

3.加入苄醛显色缓冲液后,应1h内检测完毕。

4.在皂化过程中,震荡不要剧烈,以免形成乳化层。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效

1
查看完整版本: 单胺氧化酶MAO检测试剂盒醛苯腙微